歡迎光臨上海香蕉视频app安卓生物科技有限公司
主頁 > 產品中心 > 生化試劑 > 抗生素/抗真菌素 > MS0009PZeocin (Powder) 博萊黴素 抗生素
產品中心
Zeocin (Powder) 博萊黴素 抗生素

Zeocin (Powder) 博萊黴素 抗生素

簡要描述:

Zeocin (Powder) 博萊黴素 抗生素 Zeocin是一種作用於真核和原核細胞的選擇性抗生素。來自Streptoalloteichus hindustanus的Sh ble基因賦予Zeocin抗性,該基因編碼一種13,665Da大小的蛋白,以化學計量方式結合Zeocin,抑製其DNA雙鏈切割活性。

產品時間:2020-06-23

打印當前頁

分享到:

Zeocin (Powder) 博萊黴素

 

產品標簽

Zeocin 博萊黴素(博來黴素);Phleomycin 腐草黴素;Sh ble基因;Hygromycin B潮黴素B;G418 遺傳黴素;CAS NO.:11006-33-0

 

產品信息

產品名稱

產品編號

規格

價格(元)

Zeocin (Powder) 博萊黴素(粉末) 

MS0009P-100MG

100mg

460

Zeocin (Powder) 博萊黴素(粉末) 

MS0009P-500MG

500mg

1660

Zeocin (Powder) 博萊黴素(粉末) 

MS0009P-1000MG

1g

3160

【提示1】:另現貨供應Invitrogen原裝進口的Zeocin(博來黴素); 

【提示2】:另現貨供應母液形式的Zeocin(博來黴素),使用更便捷,且價格更經濟。

產品名稱

產品編號

規格

價格(元)

Zeocin (100mg/ml) 博萊黴素(100 mg/ml)

MS0009-125MG

125mg

420

Zeocin (100mg/ml) 博萊黴素(100 mg/ml)

MS0009-1000MG

8×125mg

2850

【提示3】:對Zeocin不敏感的細胞,如絲狀真菌和一些酵母菌,建議使用腐草黴素(貨號:MS0008-1ML),抗性基因同樣為Sh ble。

【提示4】:特價供應含Zeo+基因序列的質粒— pcDNA 3.1/Zeo(+)(Invitrogen of Thermo),序列圖譜點擊下載文檔。 

產品描述

Zeocin是一種作用於真核和原核細胞的選擇性抗生素。來自Streptoalloteichus hindustanusSh ble基因賦予Zeocin抗性,該基因編碼一種13,665Da大小的蛋白,以化學計量方式結合Zeocin,抑製其DNA雙鏈切割活性。因此,能表達此蛋白的真核和原核宿主細胞具有Zeocin抗性。

Zeocin是腐草黴素D1Phleomycin D1)的商業名稱,是一種銅離子螯合的糖肽抗生素(來源於鏈黴菌Streptomyces verticillus的突變株),銅離子的存在使其呈藍色,此銅螯合的形式為無活性。當抗生素進入細胞後,二價銅離子(Cu2+)被還原為一價銅離子(Cu+),並被細胞內的巰基化合物去除。銅離子被去除後,Zeocin被活化,嵌入DNA使其斷裂,最終導致細胞死亡。Zeocin作用譜廣泛,對細菌、真核微生物、植物和哺乳動物細胞具很強的毒性。

本品以藍色粉末形式提供,低內毒素水平,達細胞培養級。通常情況,哺乳動物細胞的篩選濃度範圍是50-400 µg/ml,細菌的篩選濃度為25 µg/ml

我司還提供無菌溶液形式的Zeocin(貨號:MS0009-125MGMS0009-1000MG),濃度是100mg/ml,使用起來更加方便,隻需直接加入培養基到所需工作濃度即可。

產品特性

1) CAS NO.:11006-33-0

2) 外觀:藍色粉末

3) 內毒素:<1 EU/mg

4) 溶解性:易溶於水(>500 mg/ml

5) 質量控製:分別對Zeocin敏感或Zeocin耐性的哺乳動物細胞測定抗生素活性。

保存與運輸方法

保存: +4℃幹燥保存,至少1年有效。

運輸:室溫運輸。

注意事項

1) Zeocin粉末容易受潮,一定要注意幹燥保存。每一次使用完後需蓋緊管子。

2) Zeocin是一種不穩定化合物,在高pH和低pH或存在弱氧化劑的情況下會發生不可逆變性。

3) Zeocin對高濃度酸和堿都很敏感,但短期暴露在弱酸下能耐受。

4) Zeocin對光敏感,需將抗生素,或含該抗生素的平板或培養基置於黑暗處。

5) Zeocin有毒,操作時需注意防護,切勿與身體或皮膚直接接觸。

6) Zeocin™是Invivogen公司的商標產品。

7) 為了您的安全和健康,請穿實驗服並戴一次性手套操作。

母液製備

1)將低溫保存的Zeocin置於室溫回溫至少20min,加入適量HEPES buffer(5g/L, pH 7.2±0.1),充分溶解,配製成100mg/ml溶液。2)用0.22µm濾膜過濾除菌。3)溶液置於4℃保存12個月有效,或-20℃保存,18個月有效。

操作步驟(以哺乳動物細胞為例)

【注1】:Zeocin的殺滅機製不同於新生黴素(neomycin)和潮黴素B(hygromycin B),細胞不會聚集成團和從培養板表麵脫落。一旦接觸到Zeocin,敏感細胞會出現如下的形態變化:1)細胞體積明顯增加(類似於巨細胞病毒感染容納性細胞引起的腫大效應);2)異常的細胞形狀包括細胞長臂(long appendages)出現;3)胞漿內出現大型空泡(源於內質網、高爾基體或支撐蛋白的破裂);4)質膜和核膜破裂,導致膜上出現許多孔。這些敏感細胞最終會完全破損,僅僅以細胞碎片的形式存在。

【注2】:Zeocin抗性細胞按正常周期分化產生不同於敏感細胞的克隆。抗性細胞在形態上,與未接觸Zeocin™的正常細胞沒有任何差異。

【注3】:Zeocin用於哺乳動物細胞篩選常用濃度為50-1000µg/ml(平均常用濃度為250-400μg/mL)影響篩選濃度的主要因素包括離子強度,細胞類型,細胞密度以及生長速率。以下步驟僅作參考,請根據自身實驗體係做適當調整。

一、細胞對Zeocin敏感性的確定(殺滅曲線建立)

  • 重新鋪板或者將滿盤細胞重新分盤,使得細胞密度約25%,按照8個平板/組準備,培養24h,去除舊培養基。
  • 加入含不同濃度Zeocin的篩選培養基,Zeocin濃度可設置為0, 50, 100, 200, 400, 600, 800和1000 μg/ml,每個濃度做3個平行;也可根據自身實驗體係,設置不同的濃度梯度。
  • 每3-4天更換新鮮的篩選培養基,並觀察存活細胞的比例。選擇在合適時間(1-2周內)殺死大多數細胞的濃度為最加工作濃度。【】:若是難以在顯微觀察下區分活細胞,建議使用台盼藍染色來計算存活細胞的數量,以確定Zeocin的最適濃度

二、篩選穩定轉染細胞係

  • 轉染細胞,100mm培養皿進行培養。以未轉染的細胞作為陰性對照。
  • 轉染後,用預熱的1X PBS洗滌一次,加入新鮮培養基。
  • 轉染48-72h後,用含有最加濃度Zeocin(由滅殺曲線確定)的新鮮培養基篩選細胞。為了更好的鑒定和篩選細胞集落,建議將細胞按比例稀釋成一係列濃度。

注】:若待篩選細胞對Zeocin的抗性明顯強於大部分細胞,按照以下方法克服此類耐性:用含Zeocin培養基進行細胞分盤,置於37°C孵育2-3h,使得細胞貼壁。然後將細胞置於4°C,2h。記得使用Hepes作為培養基的緩衝體係。重新將細胞置於37°C孵育。4°C孵育細胞的目的是短時間內終止細胞分化,使得Zeocin能發揮作用,殺死細胞。

  • 每3-4天更換新鮮的選擇培養基,直到出現細胞集落。
  • 挑選並轉移克隆到96或48孔板中。在進行更大孔徑培養板或培養皿上擴大培養之前,確保培養細胞密度近100%。

、穩定轉染細胞係的維持培養

可采取以下方式維持培養穩定轉染細胞:

1)使用含相同劑量Zeocin的篩選培養基來維持培養;

2)降低Zeocin劑量為原來的一半進行維持培養;

3)使用正好能預防敏感細胞生長但不足以致死的Zeocin劑量來維持培yang【根據殺滅曲線來判斷】。

 

相關產品 

貨號

名稱

簡單描述

MS0007-1ML

Blasticidin S 殺稻瘟菌素S (滅瘟素)

bsr/BSD基因篩選抗生素

MS0008-1ML

Phleomycin腐草黴素

Sh ble基因篩選抗生素

MS0009-125MG

Zeocin博萊黴素

Sh ble基因篩選抗生素

MS0010-1G

G418 Sulfate (Geneticin) 遺傳黴素

neo基因篩選抗生素

MS0011-25MG

Puromycin Dihydrochloride 嘌呤黴素鹽酸鹽

pac基因篩選抗生素

MS0003-1G

Hygromycin B 潮黴素B

hph基因篩選抗生素

一 某些哺乳動物細胞的Zeocin工作濃度

Zeocin常用的工作濃度為100μg/ml,但是,最加的工作濃度需要根據細胞類型和實際的實驗體係來確定。某些哺乳動物細胞的建議工作濃度列在下表:

細胞係

培養基

Zeocin工作濃度(μg/ml)

B16

RPMI

20-250

CHO

DMEM

100-500

COS

DMEM

100-400

HEK293

DMEM

100-400

HeLa

DMEM

50-100

J558L

RPMI

400

MCF-7

DMEM

100-400

MEFs

DMEM

200-400

THP-1

RPMI

200

 

 

 

 — —Written/Edited by V. Shallan【版權歸MKBio香蕉视频app安卓所有】

 

 

上海香蕉视频app官网生物科技有限公司是一家涉足於生命科學和生物技術領域研究的試劑、儀器和實驗室消耗品與實驗服務工作,主要從事細胞生物學、植物學、分子生物學、免疫學、生物化學、蛋白組學。生物製藥與診斷試劑研發生產等領域。 本公司秉承以人為本,以誠為信、合同守信的經營理念。堅持"品質保障"的原則為廣大客戶提供優質產品。

 

Zeocin (Powder) 博萊黴素 抗生素

Zeocin (Powder) 博萊黴素 抗生素

留言框

  • 產品:

  • 留言內容:

  • 您的單位:

  • 您的姓名:

  • 聯係電話:

  • 常用郵箱:

  • 詳細地址:

  • 省份:

  • 驗證碼:

    請輸入計算結果(填寫阿拉伯數字),如:三加四=7
  • © 2019 上海香蕉视频app观看软件生物科技有限公司 版權所有 技術支持:環保在線
  • 電 話:18616957973 傳 真:86-021-54736159 QQ號碼:1563822900 郵 箱:2971634497@qq.com 地 址:上海市閔行區虹梅南路2588號綠亮科創園1幢A棟321室
  • 備案號:滬ICP備16016464號-3 總訪問量:164363
在線客服 聯係方式

服務熱線

18616957973